兔病毒性出血症抗体水平和保护率

1.1 资料非免疫新西兰肉兔，由江苏省农科院兽医研究所试验动物中间供给。兔病毒性出血症安排灭活疫苗、兔病毒性出血症抗原（RHDV）、兔病毒性出血症阳性血清、兔病毒性出血症阴性血清，均由江苏省农业科学院兽医研究所供给。人“O”型血，由南京军区总医院供给。 TGL-16G型台式高速离心机，养兔技术上海医用剖析仪器厂出产；WMK-2型恒温箱，南京试验仪器厂出产；100µl移液枪，eppendorf公司出产；大孔U型血凝板。

1.2 攻毒试验挑选免疫前后HI抗体效价别离为0、1、2、3、4的家兔各6只，别离注射HA为3的RHDV液1ml攻毒，记载逝世时刻、剖检病变，并进行兔出血症判定，比拟不一样HI效价水平的维护率。

1.3母源抗体水平的测定取30、35、40、45、50、55和60日龄的新西兰兔各4只，耳缘静脉采血，别离血清，56℃水浴锅内灭活30min，测定母源抗体效价

1.4 免疫试验取1.3家兔，别离颈部皮下注射兔病毒性出血症灭活疫苗1mL免疫。别离于免疫1～8周同法采血、测定免疫后抗体效价的动态改变。

1.5 抗体效价测定办法用微量血凝按捺（HI）法 [9]。取待检血清50µl，在血凝板上用等量生理盐水倍比稀释6个梯度，每孔参加4单位血凝病毒，37℃感作30min，参加等量的1％新鲜人“O”型红细胞，4℃感作30min,调查成果。一起设阳性血清和阴性血清对照。测定重复3次，成果以平均数±标准差表明，用SPSS软件统计剖析。

2.1 不一样抗体效价水平的维护效果抗体效价高于3 log2时可发作100％的维护，2 log2的维护率仅为50％，2 log2以下时，无维护效果（表1）。

表1 不一样抗体效价水平的维护效果

2.2 母源抗体效价的动态改变 30日龄的母源抗体最高，为3.25 log2，可以发作有用的维护。今后随日龄增大逐渐降低，35日龄降低到2.5 log2，可到达50％的维护，40～60日龄仅有0.25～1.25 log2（图1略）。

2.3 免疫后抗体效价的动态改变 30日龄免疫，抗体效价不光不升、反而明显降低，基本无维护效果；35日龄免疫，抗体峰值较低较短，仅为3.25 log2，有用维护时刻较短，仅为2周；40、45日龄免疫，抗体峰值升高到5.5 log2以上，有用维护时刻达5周；50、55、60日龄免疫，抗体峰值到达6.25 log2以上，有用维护时刻达7周（表2略）。

3.1母源抗体与维护率的联系幼兔出世之后，其体内兔病毒性出血症母源抗体可通过胎盘和初乳两个方法取得[10],初生乳兔在5~10日龄内其血清中兔病毒性出血症抗体HI效价与免疫母兔适当，之后幼兔血清抗体水平敏捷降低[11]。本试验成果表明，HI效价为3 log2时，可反抗RHDV强毒进犯，可将3 log2定为RHD的有用维护效价；母源抗体与日龄呈负关联，30日龄的母源抗体最高，可以发作有用的维护，这也能够是幼兔RHD发作较少的缘由之一；到35日龄，母源抗体降低到2.5 log2，仅有50％的维护，尔后的母源抗体水平已很难反抗RHDV的进犯。

3.2 免疫日龄对抗体峰值和有用维护时刻的影响免疫成果表明，免疫日龄与血清抗体峰值和有用维护时刻呈正关联，30日龄免疫，抗体效价不光不升、反而明显降低，无维护效果，能够因为母源抗体以及幼兔免疫系统发育不成熟等缘由导致[12]；35日龄免疫，抗体峰值较低，有用维护时刻2周；40、45日龄免疫，抗体明显升高，峰值达5.5 log2以上，有用维护时刻5周；50、55、60日龄免疫，抗体峰值6.25 log2以上，有用维护时刻7周。可是近年来，兔病毒性出血症的发病呈现幼龄化，40日龄兔的发病率达83.3％[13]，因而有必要挑选适宜的免疫日龄以削减RHD的发作。

河南肉兔饲料公司http://www.gxyz168.com/